Comment vérifier la qualité du bêta-glucane de levure ?

Les bêta-glucanes provenant de différentes sources ont des structures moléculaires différentes, ce qui entraîne des activités immunitaires différentes. Par exemple, le levure bêta1,3/1,6-D-glucanase a une structure moléculaire unique, en particulier le rapport entre les liaisons bêta-1,6-glycosidiques et le nombre total de liaisons glycosidiques. Cette structure moléculaire permet une reconnaissance rapide et facile par les récepteurs des cellules immunitaires, ce qui entraîne une régulation efficace des cellules immunitaires (Danielson et al., 2010).

Méthodes de test courantes dans le monde

Il est important de tester la qualité du bêta-glucane présent dans la levure. Habituellement, la teneur en bêta-glucane déterminait la qualité du bêta-glucane de levure. Généralement, le bêta-glucane à haute teneur est de meilleure qualité. L'invention concerne en particulier des normes et des procédés permettant de contrôler la quantité de bêta-glucane de levure et de produits de levure associés. Le test du bêta-glucane est la principale mesure pour tester les normes du produit. La qualité du contenu en bêta-glucane de levure dans un produit donné est importante pour la mesure du standard et de la qualité. Le Méthode HPLC de tester la qualité du bêta-glucane de levure présente l'avantage de pouvoir mesurer la qualité et la quantité des produits en les combinant. Le bêta-glucane présent dans les produits à base de levure peut être spécifiquement détecté. La méthode est très efficace en termes de séparation et de sensibilité, a une faible limite de détection, une erreur minimale de répétabilité et est exempte de perturbations. Si 70 % de la teneur en bêta-glucane est présente dans le produit, cela est considéré comme un bêta-glucane de bonne qualité (Danielson et al., 2010).

Les monographies FCC sont des normes internationalement reconnues pour les ingrédients alimentaires. Il s'agit de documents d'information conçus pour aider les consommateurs à identifier ou à l'authenticité de différents ingrédients alimentaires ou d'autres produits agricoles. La monographie FCC comprend des tests et d'autres spécifications pour l'identification des produits, les impuretés et d'autres tests utiles pour décrire la pureté et la qualité des ingrédients. Pour la consommation humaine, il est important d’utiliser du bêta-glucane à teneur plus élevée (Beta Glucan Monograph, 2011).

Norme HPLC-chinoise

HPLC signifie Chromatographie Liquide Haute Performance. Il s’agit d’une technique de chimie analytique qui permet de séparer, d’identifier et de quantifier avec précision chaque élément d’un mélange réactionnel. Les méthodes HPLC permettant de vérifier la qualité du bêta-glucane de levure sont bien développées et largement acceptées. Les échantillons de bêta-glucane en masse sèche sont déterminés par séchage jusqu'à masse constante. Pour la méthode d'hydrolyse acide, la méthode à l'acide trifluoroacétique (TFA) ou sulfurique est utilisée. L'échantillon a ensuite été vérifié pour analyser la fraction massique de bêta-glucane. Les concentrations de glucose dans les échantillons hydrolysés sont déterminées par HPLC et traitées pour déterminer la fraction massique de bêta-glucane dans les glucides totaux. Le glucose est déterminé en utilisant la HPLC équipée du détecteur. Rapport acétonitrile/eau (75:25) utilisé comme phase mobile par débit de 1 ml/min et température de colonne de 40 °C pendant 12 minutes. La fraction massique de bêta-glucane a été calculée à partir de la concentration de glucose dans les hydrolysats par HPLC (Freimund et al., 2005 ; Zechner-Krpan et al., 2010).
La spectroscopie FTIR est utilisée pour analyser différents polysaccharides, dont le bêta-glucane. L'application de FTIR bêta-glucane présente un avantage lorsqu’il est utilisé à des fins alimentaires. Des échantillons de protéines ont été analysés et une microanalyse élémentaire organique d'échantillons de bêta-glucane lyophilisés a été réalisée. Cette méthode utilise d'abord la spectroscopie infrarouge FTIR pour déterminer que la substance mesurée est le bêta 1,3/1,6-D-glucane, puis mesure la teneur en bêta-glucane par chromatographie liquide HPLC. L'avantage de cette méthode de détection est une grande stabilité.

FCC(USP)-norme américaine

La Pharmacopée des États-Unis (USP) a développé la monographie pour identifier le bêta-glucane de la levure de boulangerie (Saccharomyces cerevisiae). Le comité d'experts de l'USP a approuvé les monographies proposées après avoir été publiées dans Pharmacopeia Forum pour commentaires publics. L'USP établit des normes permettant aux fabricants de se conformer aux produits légalement commercialisés aux États-Unis. Ces monographies traitent de la qualité, de l'identification, de l'étiquetage, de la pureté et de l'activité, entre autres tests (Monographie du bêta-glucane, 2011).
FCC utilise la bêta1,3/1,6-D-glucanase pour décomposer le bêta1,3/1,6-D-glucane en glucose, donc la valeur mesurée est directement bêta1,3/1,6-D -La teneur en glucane, cette méthode est donc plus rigoureuse. Elle repose principalement sur la méthode enzymatique du glucose. La technique implique la digestion du bêta-glucane en glucose, qui est ensuite mesurée par une méthode enzymatique colorimétrique. Tout d’abord, le bêta-glucane contenant est gélatinisé dans du KOH aqueux. Ensuite, l'échantillon est dilué avec un tampon et traité avec l'enzyme lyticase. La lyticase est une enzyme endoglucanase qui décompose partiellement le bêta-glucane et le solubilise. La lyticase est traitée avec l'exo-1,3-β-D-glucanase et la bêta-glucosidase disponibles, qui convertissent l'oligosaccharide bêta-glucane soluble en glucose (Danielson et al., 2010).
L’inconvénient de cette méthode est qu’elle doit être testée avec une enzyme particulière. De plus, l’activité enzymatique n’étant pas très stable, les résultats des tests peuvent varier considérablement. Mais cette méthode est actuellement la méthode de test la plus reconnue au niveau international.

Méthode de test Hiyeast

Hiyeast est un producteur professionnel de β-glucane de levure en Chine.
Ils produisent un produit bêta-glucane de levure de la plus haute qualité qui répond aux critères de la HPLC chinoise et aux normes internationales de la FCC (USP). La mission est d'améliorer la santé publique conformément aux normes internationales (Danielson et al., 2010). Ces méthodes de test de qualité garantissent la qualité, la sécurité et les avantages des médicaments et des aliments. La méthode de test Hiyeast répond à des normes élevées et les résultats des tests sont conformes aux normes internationales.
Hiyeast fournit du bêta-glucane de levure de la plus haute qualité, car chaque lot d'exportation de bêta-glucane de levure est testé par la méthode HPLC. Il est de haute qualité et contient au moins 70% de teneur en bêta-glucane. De plus, ils fournissent également une inspection externe USP, et le produit a été effectué par l'intermédiaire de l'organisation faisant autorité aux États-Unis pour les tests, le CCRC (centre de recherche sur les glucides complexes). L'identification par RMN de la liaison bêta-1,3/1,6-glucane (1,6) liée au bêta-glucane/totale est de 17 % (Zechner-Krpan et al., 2010).
Actuellement, presque tous les β-glucanes de levure exportés en Chine sont testés par HPLC. De plus, la méthode de test HPLC pour chaque lot de produits fournit également le service d'envoi à l'organisation faisant autorité pour inspection. Hiyeast s'engage à fournir des ingrédients fonctionnels innovants, différenciés et scientifiquement prouvés pour aider ses clients à obtenir des produits de qualité qui contribuent à un monde sain et durable.

Les références

Monographie du bêta-glucane. (2011). L'USP utilise Biothera Info pour la monographie du bêta-glucane. INSIDER sur les produits naturels. https://www.naturalproductsinsider.com/regulatory/usp-uses-biothera-info-beta-glucan-monograph

Černá, M., Barros, A.S., Nunes, A., Rocha, S.M., Delgadillo, I., Čopı́ková, J., & Coimbra, MA (2003). Utilisation de la spectroscopie FT-IR comme outil pour l'analyse des additifs alimentaires polysaccharidiques. Polymères glucidiques, 51(4), 383-389. https://doi.org/10.1016/S0144-8617(02)00259-X

Danielson, ME, Dauth, R, Elmasry, NA, Langeslay, RR, Magee, AS. & Will, PM (2010). Méthode enzymatique pour mesurer la teneur en β-1,3-β-1,6-glucane dans les extraits et les produits formulés (dosage GEM). Journal de chimie agricole et alimentaire, 58(19), 10305-10308. https://doi.org/10.1021/jf102003m

Freimund, S., Janett, S., Arrigoni, E., . & Amad, R. (2005). Méthode de quantification optimisée pour le 1,3-β-d-glucane et le ɑ-d-mannane dérivés de levures. Recherche et technologie alimentaires européennes, 220(1), 101-105. https://doi.org/10.1007/s00217-004-1008-0

Zechner-Krpan, V., Petravi, V., Gospodari, I., & Sajli, L. (2010). Caractérisation des b-glucanes isolés de la levure de bière et séchés par différentes méthodes. 9.