Como verificar a qualidade do beta-glucano de levedura?

O beta-glucano derivado de diferentes fontes possui diferentes estruturas moleculares, que resultam em diferentes atividades imunológicas. Por exemplo, o Levedura beta1,3/1,6-d-glucanase possui uma estrutura molecular única, especialmente a proporção de ligações beta-1,6-glicosídicas e o número total de ligações glicosídicas. Essa estrutura molecular facilita o reconhecimento rapidamente pelos receptores de células imunológicas, o que resulta em regulação celular imunológica eficiente (Danielson et al., 2010).

Métodos de teste convencionais no mundo

É importante testar a qualidade da beta-glucana em leveduras. Geralmente, o conteúdo da beta-glucana determinou a qualidade da beta-glucana de levedura. Geralmente, o beta-glucano com alto conteúdo tem melhor qualidade. Particularmente, refere-se a padrões e métodos para controlar a quantidade de beta-glucana de levedura e produtos relacionados de leveduras. Testar o beta-glucano é a principal medida para testar os padrões do produto. A qualidade do conteúdo de fermento beta-glucano em um determinado produto é importante para a medição de padrão e qualidade. O Método HPLC de testar a qualidade do fermento beta-glucano tem a vantagem de medir a qualidade e a quantidade de produtos combinando. O beta-glucano em produtos de levedura pode ser detectado especificamente. O método é altamente eficiente em separação e sensibilidade, com baixo limite de detecção, erro mínimo na repetibilidade e livre de perturbações. Se 70% do conteúdo beta-glucano estiverem presentes no produto, ele é considerado a boa qualidade do beta-glucano (Danielson et al., 2010).

As monografias da FCC são padrões internacionalmente reconhecidos para ingredientes alimentares. Estes são documentos de informação projetados para ajudar os consumidores na identificação ou autenticidade de diferentes ingredientes alimentares ou outros produtos agrícolas. A monografia da FCC consiste em testes e outras especificações para identificação de produtos, impurezas e outros testes que são úteis na descrição da pureza e qualidade dos ingredientes. Para o consumo humano, é importante usar beta-glucano com maior conteúdo (Beta Glucan Monograph, 2011).

Padrão HPLC-Chinese

HPLC significa cromatografia líquida de alto desempenho. É uma técnica de química analítica que pode separar, identificar e quantificar cada elemento precisamente em uma mistura de reação. Os métodos de HPLC para verificar a qualidade do fermento beta-glucano são bem desenvolvidos e amplamente aceitos. As amostras beta-glucano de massa seca são determinadas pela secagem a massa constante. Para o método de hidrólise ácida, o método trifluoroacético (TFA) ou ácido sulfúrico é usado. A amostra foi verificada ainda mais para análise de fração de massa beta-glucana. As concentrações de glicose em amostras hidrolisadas são determinadas usando HPLC e processadas para determinar a fração de massa de beta-glucano no total de carboidratos. A glicose é determinada usando o HPLC equipado com o detector. A proporção de acetonitrila/água (75:25) usada como fase móvel por taxa de fluxo 1 ml/min e temperatura da coluna 40oC por 12 minutos. A fração em massa do beta-glucano foi calculada a partir da concentração de glicose em hidrolisados ​​usando HPLC (Freimund et al., 2005; Zechner-Krpan et al., 2010).
A espectroscopia FTIR é usada para analisar diferentes polissacarídeos, incluindo beta-glucano. A aplicação de Ftir beta-glucano tem uma vantagem quando usado para fins de alimentos. As amostras de proteínas foram analisadas e a microanálise elementar orgânica de amostras beta-glucano liofilizadas realizadas. Este método usa primeiro a espectroscopia infravermelha FTIR para determinar que a substância que está sendo medida é beta 1,3/1,6-d-glucano e depois mede o conteúdo de beta-glucano por cromatografia líquida HPLC. A vantagem desse método de detecção é de alta estabilidade.

FCC (USP)- Padrão dos EUA

A Farmacopeia dos Estados Unidos (USP) desenvolveu a monografia para identificar beta-glucano a partir de leveduras de padeiro (Saccharomyces cerevisiae). O Comitê de Especialistas da USP aprovou as monografias propostas após ser publicado no Fórum de Farmacopeia para Comentários do Público. A USP estabelece padrões para os fabricantes cumprirem os produtos legalmente comercializados nos EUA.
A FCC usa beta1,3/1,6-d-glucanase para decompor beta1,3/1,6-d-glucano em glicose, portanto, o valor medido é diretamente beta1,3/1,6 -d -o conteúdo glucano, portanto esse método é mais rigoroso. É baseado principalmente no método enzimático da glicose. A técnica envolve a digestão da beta-glucana à glicose, que é ainda mais medida por um método enzimático colorimétrico. Em primeiro lugar, o beta-glucano que contém é gelatinizado no KOH aquoso. Em seguida, a amostra é diluída com tampão e tratada com enzima lyticase. A lyticase é uma enzima endoglucanase que quebra a beta-glucana parcialmente e a solubiliza. A litase é tratada com o Exo-1,3-D-Glucanase e a beta-glucosidase disponível, que convertem o oligossacarídeo beta-glucano solúvel em glicose (Danielson et al., 2010).
A desvantagem desse método é que ele precisa ser testado com uma enzima específica. Além disso, como a atividade da enzima não é muito estável, os resultados do teste podem variar significativamente. Mas esse método é o método de teste mais reconhecido internacionalmente no momento.

Método de teste HiYeast

Hiyeast é um fabricante profissional de β-glucana na China.
Eles produzem o produto beta-glucano de levedura da mais alta qualidade que atende aos critérios de HPLC chinês e padrões internacionais da FCC (USP). A missão é melhorar a saúde pública até os padrões internacionais (Danielson et al., 2010). Esses métodos de teste de qualidade garantem a qualidade, segurança e benefícios, medicamentos e alimentos. O método de teste HIYEAST é um alto padrão e os resultados dos testes estão de acordo com os padrões internacionais.
O HiYeast fornece a beta de levedura da mais alta qualidade, pois todo lote de exportação de beta-glucano de levedura é testado pelo método HPLC. É de alta qualidade que contém pelo menos 70% de conteúdo de beta-glucano. Além disso, eles também fornecem inspeção externa da USP, e o produto foi através da organização autoritária nos EUA para testar-CCRC (Centro de Pesquisa de Carboidratos complexos). A identificação de RMN da beta-1,3/1,6-glucana (1,6) vinculada ao vínculo beta-glucano/total é de 17% (Zechner-Krpan et al., 2010).
Atualmente, quase todos os β-glucano de levedura exportados na China são testados pelo HPLC. Além disso, o método de teste HPLC para cada lote de produtos também fornece o serviço de envio à organização autoritária para inspeção. O HiYeast está comprometido em fornecer ingredientes funcionais inovadores, diferenciados e cientificamente comprovados para ajudar os clientes a obter produtos de qualidade que contribuem para um mundo saudável e sustentável.

Referências

Monografia beta glucana. (2011). USP usa informações de biothera para a monografia beta glucana. Insider de produtos naturais. https://www.naturalproductsinsider.com/regulatory/usp-uses-biothera-info-teta-glucan-monograf

Černá, M., Barros, A. S., Nunes, A., Rocha, S.M., Delgadillo, I. & Coimbra, M. A. (2003). Uso da espectroscopia FT-IR como uma ferramenta para a análise de aditivos alimentares de polissacarídeos. Polímeros de carboidratos, 51(4), 383-389. https://doi.org/10.1016/s0144-8617(02)00259-x

Danielson, M.E., Dauth, R., Elmasry, N. A., Lanestlay, R.R., Magee, A. S., & Will, P.M. (2010). Método enzimático para medir o conteúdo β-1,3-β-1,6-glucana em extratos e produtos formulados (ensaio GEM). Journal of Agricultural and Food Chemistry, 58(19), 10305-10308. https://doi.org/10.1021/jf102003m

Freimund, S., Janett, S., Arrigoni, E., & Amad, R. (2005). Método de quantificação otimizada para 1,3- β-G-Glucano derivado de leveduras e-d-mannan. Pesquisa e tecnologia européia de alimentos, 220(1), 101-105. https://doi.org/10.1007/s00217-004-1008-0

Zechner-Krpan, V., Petravi, V., Gospodari, I. & Silence, L. (2010). Caracterização de B-Glucans isolados do fermento de Brewer e seco por diferentes métodos. 9.